溶液中待测物分子中的价电子能够选择性地吸收紫外或可见光，从基态跃迁到激发态，形成紫外可见吸收光谱，根据紫外可见吸收光谱中的吸收峰和摩尔吸收系数，进行定性分析。这就是化学试剂分子吸收的测定方法——分光光度法，本文对这种方法进行了详细介绍。

1. 吸收曲线法

使用自动记录型仪器时，可自动扫描绘出吸收曲线。

使用非自动记录型仪器时，在规定的波长范围时，每隔5nm~10nm测定一次吸光度，在吸收峰附近时，应每隔1nm~2nm测定一次，以波长为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线。

此方法可适用于定性分析、最大吸收波长的测定。

 2. 工作曲线法

按产品标准的规定配制四个以上浓度成适当比例的标准溶液，以空白溶液（或溶剂）为参比溶液，同时用空白溶液（或溶剂）的吸光度进行校正。在规定波长下，分别测定吸光度。以标准溶液浓度c为横坐标，相应的吸光度A为纵坐标，绘制工作曲线，同时配制适当浓度的样品溶液，在上述条件下测定吸光度，并在工作曲线上查出待测物浓度（图1），待测物的浓度应在工作曲线范围内。该溶液浓度也可根据测定的吸光度用回归方程法计算。此方法适用于杂质含量的测定。

 3. 分光光度法含量测定

按产品标准给出的方法测定。特效试剂可在规定条件下与被测物生成有色配位化合物，测定其溶液的吸光度，按标准中给出的换算系数计算含量，也可用标准样品对照法进行计算；某些酸碱指示剂可采用柱层析法将杂质分离后测主体溶液的吸光度，用标准对照法计算含量。

4. 摩尔吸收系数测定

按产品标准的规定条件测定。

摩尔吸收系数E，数值以L/（cm*mol）表示，按式（2）计算：

式中：

A——吸光度的数值；c——被测物的物质的量浓度的数值，单位为摩尔每升（mol/L）；b—光路长度（即吸收池厚度）的数值，单位为厘米（cm）。

5. 灵敏度测定

按产品标准规定条件测定。灵敏度可用摩尔吸收系数表示。

6. 质量吸收系数测定按产品标准的规定条件测定

质量吸收系数a，数值以L/（cm*g）表示，按式（3）计算：

A——吸光度的数值；

p——被测物的质量浓度的数值，单位为克每升（g/L）；

b——光路长度（即吸收池厚度）的数值，单位为厘米（cm）。